菌株分选是微生物研究与工业应用的关键环节，过程中常因技术操作、设备状态等因素出现问题，影响分选效果。以下结合实际场景，梳理常见问题并给出针对性解决方案。
一、分选纯度不足
问题表现：分选后目标菌株中混入杂菌，难以满足后续实验或生产需求。
核心原因：样品预处理不全，杂菌未有效去除；分选设备识别精度低，无法精准区分目标菌株与杂菌。
解决方案：分选前增加样品纯化步骤，如采用梯度稀释结合选择性培养基培养，初步筛选目标菌株；若使用流式细胞术或图像识别分选设备，需提前优化识别参数，例如针对目标菌株的荧光标记强度、细胞形态特征设置专属识别阈值，减少杂菌误选。
二、分选效率低下
问题表现：单位时间内分选的目标菌株数量少，无法满足高通量实验需求。
核心原因：样品浓度不合理，过稀导致设备反复识别空样本；操作流程繁琐，人工干预步骤过多。
解决方案：通过显微镜观察与计数，将样品浓度调整至设备最佳处理范围(如流式细胞术分选常需10^6-10^7个/mL)；优先采用自动化分选设备，借助配套软件预设分选程序，实现样品上样、识别、分选的全流程自动化，减少人工操作耗时。
三、菌株活性受损
问题表现：分选后目标菌株存活率低，无法正常培养与应用。
核心原因：分选过程中机械力过大(如微流控芯片通道狭窄导致细胞挤压)；分选环境不适宜(如温度过高、渗透压失衡)。
解决方案：选择低剪切力的分选设备，例如采用宽通道设计的微流控芯片；在分选缓冲液中添加保护剂(如5%甘油)，维持菌株渗透压稳定，同时将分选环境温度控制在25-30℃，避免温度剧烈波动；分选后快速将菌株转移至适宜培养基中培养，缩短暴露时间。
四、设备故障频发
问题表现：分选过程中设备突然停机或报错，导致分选中断。
核心原因：设备长期未维护，部件老化(如流式细胞术喷嘴堵塞)；样品中杂质过多，堵塞设备通道。
解决方案：定期按设备说明书维护，每周清洁分选通道、校准识别系统，每月检查易损部件(如喷嘴、管路)并及时更换；分选前对样品进行过滤处理(使用0.22μm滤膜)，去除杂质与大颗粒，避免设备堵塞。
